摘要： 目的:基于网络药理学和分子对接预测并通过动物实验验证，揭示上下两济丹治疗失眠的潜在分子机制。方法:利用TCMSP数据库获取了上下两济丹的活性成分与对应潜在作用靶点；通过GeneCards和OMIM数据库获取失眠相关的疾病靶点；利用Venny 2.1.0平台对活性成分靶点与疾病靶点取交集，获取上下两济丹治疗失眠的共同靶点；将共同靶点导入STRING数据库，构建蛋白互作（PPI）网络，结合Cytoscape 3.9.0分析后获取关键靶点；并进行GO和KEGG信号通路富集分析；通过分子对接验证核心活性成分与关键靶点的关系；最后建立PCPA诱导的失眠小鼠模型，并给予上下两济丹治疗；RT-qPCR法检测脑组织关键基因的表达。结果:筛选出上下两济丹40个活性成分，预测得到101个活性成分作用靶点，1640个失眠相关靶点；获得24个交集靶点；根据PPI网络的度值获取上下两济丹治疗失眠的5个核心靶点：IL-6、CASP3、VEGFA、PPARG和HIF1A；GO富集分析得到靶点富集于对药物的反应、对脂多糖的反应；KEGG信号通路富集分析得到关键的通路是糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、脂质和动脉粥样硬化信号通路；分子对接的结果显示核心成分（Kaempferol、(R)-canadine、Stigmasterol、Beta-sitosterol和Quercetin）能够与关键靶点（IL-6、CASP3、VEGFA、PPARG和HIF1A）紧密结合；戊巴比妥诱导睡眠试验表明，上下两济丹明显缩短睡眠潜伏期，明显延长睡眠持续时间；RT-qPCR显示，上下两济丹治疗降低了IL-6、CASP3、VEGFA、PPARG和HIF1A的mRNA表达水平。结论:上下两济丹可能通过下调IL-6、CASP3、VEGFA、PPARG和HIF1A的表达治疗失眠。

关键词: 上下两济丹；失眠；网络药理学；分子对接