目的:基于灰色关联分析法及偏最小二乘回归法预测荆芥穗药效部位体外治疗结肠癌的药效质量标志物,为其质量控制提供参考依据。方法:采用HPLC法建立不同产地荆芥穗化学轮廓谱,且进行对照品比对;采用AO/EB染色法及CCK-8法,开展荆芥穗治人肠癌HT-29细胞的药效学研究;采用灰色关联及偏最小二乘法,基于化学轮廓谱与抗肿瘤活性的关联,筛选荆芥穗治疗结肠癌的药效质量标志物。结果:10批不同产地荆芥穗药效部位相似度良好,相似度均>0.96。不同产地荆芥穗提取物均能明显抑制人肠癌HT-29细胞的增殖。灰色关联及偏最小二乘法分析结果显示,原儿茶醛、咖啡酸、对香豆酸、木犀草苷、橙皮苷、异绿原酸C、木犀草素、香叶木素与荆芥穗药效部位治疗结肠癌作用关联度值较高且呈正相关。结论:荆芥穗药效部位中的8种成分可以作为荆芥穗治疗结肠癌的潜在药效质量标志物。

目的:基于谱效关系研究白花败酱草黄酮部位抗肿瘤潜在活性成分。方法:建立白花败酱草黄酮部位指纹图谱,利用灰色关联度分析相关成分,结合偏最小二乘回归分析法进一步明确白花败酱草黄酮部位抗肠肿瘤作用的物质基础。结果:应用灰色关联度及偏最小二乘回归分析法,找到7个相关色谱峰（7号、10号、15号、18号、19号、20号、24号峰）,经指纹图谱比对为绿原酸、咖啡酸、野黄芩苷、异荭草苷、木犀草素、异牡荆素、芹菜素。结论:通过谱效关系研究结果显示,白花败酱草黄酮部位抗肠肿瘤作用是药效物质群共同作用的结果,分析出7种成分,可为进一步实验奠定基础。?

目的:根据中药路路通的功能主治、性味归经,采用体外药效评价方法,对路路通不同药效成分及提取部位进行体外药效评价研究,确定路路通的药效部位,为其抗肿瘤药物筛选奠定前期实验基础。方法:采用MTT法开展不同浓度路路通药材中5种活性成分对于6种人源肿瘤细胞的体外药效评价研究。结果:实验研究表明,路路通中5种活性成分对6种不同器官的肿瘤细胞均有一定的抑制作用,二氯甲烷和乙酸乙酯提取液表现出较强的抗肿瘤活性;路路通中5种活性成分对人肝癌细胞株SMMC-7721、人胃癌细胞株HGC-27、人非小细胞肺癌细胞株A549的抑制作用优于其他3种肿瘤细胞。结论:研究结果为中药路路通药效成分的筛选及候选抗肿瘤药物的研发奠定了前期实验基础。

目的:开展矿物药白矾、硝石配伍组对宫颈癌Hela细胞抑制作用的研究,筛选出白矾、硝石最佳配伍比例及浓度,为进一步解释平消片中白矾、硝石的配伍比例的合理性提供实验依据。方法:设计并制作一种集浓度自动生成及配伍功能的微流控芯片,结合Hoechst 33342/PI双染荧光技术,以Hela细胞凋亡坏死率为评价指标,进行白矾、硝石配伍组对Hela细胞体外抑制试验,并在此基础上开展白矾、硝石配伍组与平消片的药效差异性研究。结果:白矾、硝石各配伍组与对照组的Hela细胞凋亡坏死率相比,差异有统计学意义(P<0.01),白矾、硝石最佳配伍比例为1∶1,最佳浓度为7.5 g/L,最佳配伍组Hela细胞的凋亡坏死率为(49.92±1.53)%;平消片阳性对照组Hela细胞凋亡坏死率为(36.21±0.23)%,原方白矾、硝石组凋亡坏死率为(32.18±1.12)%,经统计分析,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:白矾、硝石的最佳配伍比例与平消片中白矾、硝石比例一致;白矾、硝石配伍组对平消片原方药效贡献率为88.90%。白矾、硝石为平消片的抗宫颈癌的主要药效物质基础,本研究科学解释了平消片矿物药白矾、硝石配伍合理性及组方合理性,同时也为矿物药在抗肿瘤方面的新药研发提供了实验依据。

目的:构建一种集成有浓度梯度及微阀结构的微流控芯片,并利用该芯片探讨菟丝子黄酮对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)凋亡坏死的影响。方法:设计和构建一种集成有浓度梯度及微阀结构的微流控芯片,以大鼠HSC-T6细胞活力、形态等特征检验芯片的适用性;同时利用芯片探讨8种不同浓度菟丝子黄酮作用HSC-T6细胞24、48和72 h后的凋亡坏死情况。结果:细胞在芯片中生长状态良好,增殖活力强,存活率达到96%;菟丝子黄酮具有明显促细胞凋亡坏死作用,其作用细胞24 h、48 h及72 h后,细胞凋亡坏死率与空白组比较有显著差异(P<0.05),且在一定浓度下,随着给药浓度的增加及作用时间的延长,呈现量-效和时-效关系。结论:该芯片重复性及适用性良好,可极大简化药效筛选中操作的复杂性,为中药新药药效评价提供一种新方法。

目的:对核桃楸皮黄酮的体内防治肝肿瘤活性进行研究,在初步明确其化学成分及药理药效的基础上,为其可能成为抗肝肿瘤候选药物的研发工作提供前期实验基础。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS技术,结合质谱解析及对照品比对的方法,开展核桃楸皮黄酮化学成分初步指认研究,同时采用DEN致SD大鼠体内肝癌模型,开展核桃楸皮黄酮防治肝肿瘤药理药效研究。结果:通过相关方法,初步确认了核桃楸皮黄酮中的8种成分,推测了6种成分。同时药效学研究表明,核桃楸皮黄酮具有明确的体内防治肝肿瘤作用。在病理切片及甲胎蛋白病理指标上,核桃楸皮黄酮组与环磷酰胺组比较差异无统计学意义(P>0.05),但在死亡率、活动能力等生理指标上,核桃楸皮黄酮组明显优于环磷酰胺组。结论:核桃楸皮黄酮具有明确的体内防治肝肿瘤活性,与环磷酰胺组比较,有明确的死亡率低、毒副作用小等优势,为核桃楸皮黄酮可能成为抗肝肿瘤候选药物奠定了前期实验基础。

目的:观察复方木鸡颗粒对小鼠慢性肝损伤的作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:采用高脂饲料、CCl4、D-氨基半乳糖盐酸盐、刀豆蛋白(ConA)建立4种慢性肝损伤模型,测定小鼠血清转氨酶(ALT、AST)水平、肝指数和肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平,并做肝组织病理学检查。另高脂饲料所致的慢性肝损伤检测肝组织中三酰甘油(TG)含量,ConA所致的免疫性肝损伤取脾脏,称重,计算脾指数。结果:复方木鸡颗粒能显著降低4种慢性肝损伤小鼠的肝指数以及血清中AST与ALT(P<0.05或P<0.01)和肝组织中MDA水平(P<0.05或P<0.01),升高SOD水平(P<0.05或P<0.01)。高脂饲料所致慢性肝损伤小鼠肝组织中的TG含量显著降低(P<0.05或P<0.01),免疫性肝损伤中脾指数亦减小(P<0.05或P<0.01)。结论:复方木鸡颗粒对4种慢性肝损伤有不同程度的防治作用,其作用机制可能与抑制炎症因子的释放、抑制脂质过氧化反应、清除自由基等有关。

目的:通过均匀设计方法筛选出大川芎片有效组分保护缺氧损伤细胞最佳配伍比例,并找出相关通路对所得结果进行验证。方法:采用U10(108)均匀设计表,设置不同配伍组,以MTT法测定人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y存活率作为药效评价指标,将均匀设计方法与药效学实验相结合,经统计分析筛选出大川芎片有效组分保护缺氧损伤细胞最佳配比关系,同时设置验证实验来证明结果的可靠性。结果:Na2S2O4对诱导DSH-SY5Y细胞缺氧损伤有较好的效果,且各配伍组对缺氧损伤细胞均有不同程度的保护作用;CSZ均匀设计软件输出结果显示:当川芎多糖∶川芎酚酸∶川芎挥发油∶天麻多糖∶天麻总苷生药量配比为4.7∶1∶4.6∶8.7∶1.2时,保护缺氧损伤细胞效果最佳;通过通路图分析,明确乳酸脱氢酶LDH与琥珀酸脱氢酶SDH关系,可通过LDH结果验证MTT结果的可靠性。结论:复方按最佳配伍剂量入药可达到服用相同剂量使药效增强的效果,且组分入药成分清晰,为中药配伍的剂量关系及组分中药的研究探索出新的实验方法。

目的:初步探讨不同浓度四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及凋亡的影响.方法:采用流式细胞仪PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法研究不同浓度四味肝泰软胶囊作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及对细胞凋亡率的影响.结果:各浓度四味肝泰软胶囊均可以调节G1/S转换,使肿瘤细胞发生S期阻滞,造成S期细胞堆积,阻断细胞的DNA合成和复制,阻滞肿瘤细胞进入G2/M期,从而起到抑制肿瘤细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且这种诱导效应具有明显的时间-剂量-效应关系.结论:四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制肿瘤细胞DNA的合成和诱导细胞凋亡有关.
 

目的:北柴胡为临床镇痛方剂的组成药味之一,经前期文献调研及药效学实验,确定北柴胡镇痛的有效物质组为多糖类成分,实验以多糖含量和出膏率为指标,探讨北柴胡多糖组分的提取纯化工艺条件.方法:采用L9(34)正交试验,以多糖含量和出膏率的综合指标为考察指标,对影响提取工艺的提取温度、溶剂量、提取次数、提取时间进行考察;以多糖纯度为指标,对影响纯化工艺的浓缩指数、醇浓度、静置时间进行考察.结果:确定柴胡多糖组分最佳提取条件为提取温度100℃,15倍量水,回流提取3次,每次1h;最佳纯化条件为提取液浓缩成1g/mL,80%的乙醇沉淀,静置6h.结论:确定北柴胡镇痛有效物质组的最佳提取纯化工艺条件,该优化工艺条件合理、可靠,在此工艺下得到的多糖组分纯度为30.69%.