目的:建立蜜糠炒白术的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱及多成分含量测定方法。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm），乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相，流速为0.8 mL·min-1进行梯度洗脱，柱温为30℃，检测波长为240 nm，建立15批蜜糠炒白术的HPLC指纹图谱，并同时建立白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及苍术酮的含量测定方法。结果:15批蜜糠炒白术的指纹图谱呈现24个共有峰，相似度均>0.891；对其中4个共有峰进行指认，分别是白术内酯Ⅲ（11号峰）、白术内酯Ⅱ（16号峰）、白术内酯Ⅰ（20号峰）、苍术酮（24号峰）。主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘分析（OPLS-DA）结果均显示，不同产地、同产地不同批次药材制备的蜜糠炒白术质量有着明显的区分；变量重要投影系数（VIP）值>1的共有峰有7个，从大到小分别为1号、14号、4号、24号（苍术酮）、15号、16号（白术内酯Ⅱ）及2号峰。15批蜜糠炒白术的白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及苍术酮的含量依次为144.84～642.59μg·g-1、57.67～1 086.15μg·g-1、142.45～707.19μg·g-1、968.73～2 887.70μg·g-1。结论:建立的蜜糠炒白术指纹图谱及多成分定量分析方法操作简单、稳定可靠，结合化学计量学方法可实现对蜜糠炒白术的质量分析，为蜜糠炒白术质量评价标准的建立提供参考。