亚太传统医药 ›› 2024, Vol. 20 ›› Issue (6): 28-32.DOI: 10.11954/ytctyy.202406007

• 传统药学研究 • 上一篇    下一篇

化风丹药母中3种优势微生物的实时荧光定量PCR方法的建立

袁小凤,舒淇琳,曹国琼,徐剑,陈有丽,张永萍   

  1. 贵州中医药大学药学院,国家苗药工程技术研究中心,贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心,遵义廖元和堂药业有限公司
  • 出版日期:2024-06-05 发布日期:2024-06-14
  • 基金资助:
    国家自然科学基金(82360774);贵州省基础研究项目(黔科合基础-ZK[2021]一般517);贵州省教育厅滚动支持省属高校科研平台团队项目(黔教技[2022]022号);贵州省科技计划项目(黔科合中引地[2023]006);贵州省高层次创新型人才项目(黔科合平台人才-GCC[2023]037)

  • Online:2024-06-05 Published:2024-06-14

摘要: 目的:建立化风丹药母中3种优势微生物米曲霉(Aspergillus oryzae)、汉逊德巴利酵母菌(Debaryomyces hansenii)、阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)快速、有效的实时荧光定量PCR检测方法。方法:以米曲霉、汉逊德巴利酵母菌、阿氏芽孢杆菌的重组质粒为标准质粒,设计特异性引物并进行特异性、灵敏性及重复性实验。结果:3种优势微生物的熔解曲线不在同一峰值。米曲霉、汉逊德巴利酵母菌、阿氏芽孢杆菌的荧光定量PCR最低检测限度分别为0.256、514、5.08 copies/μL。不同质量浓度的标准质粒变异系数(CV)均小于5%。结论:研究表明以荧光定量PCR技术建立的米曲霉、汉逊德巴利酵母菌、阿氏芽孢杆菌的检测方法具有重复性好、特异性强、灵敏度高等优点,可用于化风丹药母发酵过程中微生物的检测及定量。

关键词: 化风丹药母;米曲霉;汉逊德巴利酵母菌;阿氏芽孢杆菌;实时荧光定量PCR