摘要:
目的:探讨快速分离小鼠颈总动脉血管平滑肌细胞(CCAVSMCs)的实验方法。方法:分离小鼠颈总动脉,用酶液Ⅰ(木瓜蛋白酶等)、酶液Ⅱ(Ⅱ型胶原酶)消化获取平滑肌细胞,并确定两步反应中酶各自的最佳消化时间,以台盼蓝染色测定细胞活性,采用免疫荧光法进行细胞鉴定。结果:在倒置显微镜下,观察并计数分离的平滑肌细胞数,酶液Ⅰ、酶液Ⅱ的消化时间分别为25min、45min时平滑肌细胞数量较多,达(50±1.3)个/低倍视野,与其他各时间点比较差异具有统计学意义(P<0.05),98%的台盼蓝染色细胞为活细胞,免疫荧光法鉴定为平滑肌细胞。结论:该方法操作简单、成本低,可在较短时间内获取数量可观、形态佳、高纯度的颈总动脉平滑肌细胞。