目的:研究狼毒大戟（Euphorbia fischeriana Steud.）体外抑菌作用并运用网络药理学及分子对接方法预测其作用机制。方法:以95%乙醇回流提取得到狼毒大戟总提物，采用纸片扩散法，研究不同浓度狼毒大戟总提物对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌体外抑菌效果。狼毒大戟的活性成分和抑菌相关靶点通过TCMSP、化源网及GeneCards等数据库进行筛选，将两者输入Venny在线平台，即可获得狼毒大戟成分治疗抑菌的交集靶点。利用STRING数据库及Cytoscape软件构建PPI网络与“药物-活性成分-疾病-靶点”相互式网络。使用DAVID数据库开展GO及KEGG基因富集分析，并利用AutoDock Tools、MOE及Chem3D进行分子对接研究。结果:革兰氏阴性菌大肠杆菌及革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌均受到不同浓度的抑制作用，两者之间存在着显著差异。从狼毒大戟筛选得到50个活性成分，作用于230个抑菌靶点。筛选出TP53、AKT1、HSP90AA1等关键靶点，通过调节TNF、Toll样受体、IL-17等信号通路对炎症反应、对异种生物刺激等显著相关生物过程，显示多种成分与多个靶点有较好的结合能力。结论:不同浓度狼毒大戟总提物对革兰氏阴性菌大肠杆菌及革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌均有抑制作用，且给药浓度与抑菌作用呈正相关。抑菌机制可能以狼毒素、狼毒色酮、月腺大戟甲素等成分与TP53、AKT1、HSP90AA1、TNF及MAPK1等关键靶点相结合，通过TNF、Toll样受体、IL-17等信号通路发挥抑菌作用。