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化风丹药母中3种优势微生物的实时荧光定量PCR方法的建立
袁小凤，舒淇琳，曹国琼，徐剑，陈有丽，张永萍
2024, 20 (6):
28-32.
[摘要]
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目的:建立化风丹药母中3种优势微生物米曲霉(Aspergillus oryzae)、汉逊德巴利酵母菌(Debaryomyces hansenii)、阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)快速、有效的实时荧光定量PCR检测方法。方法:以米曲霉、汉逊德巴利酵母菌、阿氏芽孢杆菌的重组质粒为标准质粒，设计特异性引物并进行特异性、灵敏性及重复性实验。结果:3种优势微生物的熔解曲线不在同一峰值。米曲霉、汉逊德巴利酵母菌、阿氏芽孢杆菌的荧光定量PCR最低检测限度分别为0.256、514、5.08 copies/μL。不同质量浓度的标准质粒变异系数(CV)均小于5%。结论:研究表明以荧光定量PCR技术建立的米曲霉、汉逊德巴利酵母菌、阿氏芽孢杆菌的检测方法具有重复性好、特异性强、灵敏度高等优点，可用于化风丹药母发酵过程中微生物的检测及定量。
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