亚太传统医药 ›› 2025, Vol. 21 ›› Issue (2): 17-23.DOI: 10.11954/ytctyy.202502004

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基于分级醇沉和大孔树脂的牛樟叶多糖纯化工艺优化研究

王莉,李倩,张蓓,谭培姚,陶晓静,李秋萍   

  1. 广西中医药大学,柳州市中医医院(柳州市壮医医院)药学部,柳州市中药(壮瑶药)制剂研发重点实验室/柳州市中药(壮瑶药)制剂开发工程技术研究中心
  • 出版日期:2025-02-05 发布日期:2025-02-18
  • 基金资助:
    全国中药特色技术传承人才培训项目(国中医药人教函[2023]96号);柳州市阳和工业新区应用技术研究开发与科技创新项目(2019007)

  • Online:2025-02-05 Published:2025-02-18

摘要: 目的:探究分级醇沉对牛樟叶多糖含量、纯度、抗氧化活性的影响,以获得最优粗多糖,并通过大孔树脂富集纯化,DEAE-52凝胶柱层析分离得到牛樟叶精制多糖。探索牛樟叶多糖的最佳纯化工艺,初步分离单糖组分。方法:建立多糖含量,多糖纯度,抗氧化活性3个评价指标,考察5个醇含量45%、55%、65%、75%、90%条件下分级沉淀所得的粗多糖,选择最优醇沉方案。通过比较Sevag法和TCA-乙醇法脱蛋白,以多糖保留率和蛋白清除率为指标,考察最优脱蛋白的方法。通过大孔树脂研究牛樟叶多糖的纯化工艺,包括静态吸附实验、动态吸附实验,以溶液浓度、pH、乙醇体积分数和洗脱流速为单因素考察,绘制动态图、解析图,以及DEAE柱层析图。结果:75%醇沉所得的牛樟叶多糖含量最多,纯度最高,抗氧化活性最强。TCA-乙醇法脱蛋白综合效果最佳,HPD-100树脂对牛樟叶多糖具有较好的综合纯化效率,吸附率62.1%,解析率70.05%。最佳上样浓度为0.5 mg/mL,上样速度为1.0 mL/min,上样量为115 mL,最佳pH为3,洗脱液体积分数为70%,洗脱流速为1.0 mL/min,洗脱体积为110mL。结论:牛樟叶多糖具有一定的体外抗氧化能力。DEAE-52柱层析法初步共分离出3个多糖样品Nd.1、Nd.2和Nd.3,为进一步关于牛樟叶多糖的研究开发以及利用提供了一定的理论基础。

关键词: 牛樟叶;多糖;大孔树脂;分离纯化;抗氧化活性