摘要： 目的:建立基于高通量测序技术对文冠木-4味汤混合样品鉴定研究的鉴定方法。方法:采用高通量测序技术提取文冠木-4味汤混合粉末样品中的总DNA,对ITS2片段进行PCR扩增，利用Illumina MiSeq平台对DNA片段进行双端测序，最后采用FLASH、QIIME、GraPhlAn及MEGA 7.0软件对序列进行整理并聚类分析，鉴定混合粉末中的物种。结果:混合样品中得到高质量的ITS2序列共331 436条，最终比对到了4个物种（文冠木、诃子、秦艽和黄柏）。采用Krona软件进行群落分类学组成的交互展示秦艽序列占有效序列总量的42%、文冠木为22%，诃子为20%、黄柏为16%。结论:以ITS2作为条形码，采用高通量测序技术可以鉴定出文冠木-4味汤混合样品中的物种，也为其混合药材的鉴定提供新思路。

关键词: 文冠木-4味汤；高通量测序技术；ITS2；混合粉末；分子鉴定