摘要： 目的:对比分析钩吻根、茎、叶3个部位的生物碱和非生物碱体外抗肿瘤活性，并初步探讨其作用机制。方法:利用人结肠癌细胞（HCT116）、肝癌细胞（HepG2）及人宫颈癌细胞（HeLa）等7种细胞模型，采用CCK-8法，分别检测钩吻根、茎及叶生物碱和非生物碱抑制细胞生长的活性。在此基础上，选取高活性根部位生物碱进行抑制肿瘤细胞增殖浓度依赖性考察，显微镜下观察根生物碱不同浓度及时间处理对肿瘤细胞形态变化的影响；同时，采用分子模拟对接，探索钩吻生物碱抗肿瘤主要活性成分钩吻素子、钩吻绿碱、钩吻素甲、胡蔓藤碱乙及钩吻素乙与受体蛋白MDM2的结合情况；进一步，利用Western blot法验证钩吻根生物碱对A549细胞内MDM2及p53蛋白表达的影响。结果:钩吻根、茎和叶部位生物碱、非生物碱对上述7种肿瘤细胞增殖均有一定抑制作用，且生物碱的活性普遍高于非生物碱，其中根生物碱抗肿瘤效果最强，叶非生物碱最弱；根生物碱能以浓度依赖性的方式抑制7种细胞的增殖，有效浓度主要集中在50～100μg/mL之间；形态学观察显示，相较于正常组，低浓度根生物碱（50μg/mL以下）对细胞形态变化没有太大影响，随着浓度的增加细胞贴壁性降低、骨架解体并出现凋亡小体等凋亡经典变化特征，提示其可能通过诱导细胞凋亡的方式抑制肿瘤细胞增殖；分子对接显示，钩吻抗肿瘤主要活性成分可通过氢键、碳氢键、范德华力等相互作用与MDM2蛋白有效结合，Western blot试验也证实钩吻中根的生物碱可浓度依赖性地抑制A549细胞内MDM2蛋白，并上调p53蛋白表达。结论:中药钩吻的抗肿瘤活性主要富集于根部，其中生物碱类成分的抗肿瘤作用显著优于非生物碱类成分，其作用机制可能与生物碱竞争性结合MDM2蛋白，以解除MDM2对p53的抑制，释放并激活p53介导的抗癌通路有关。

关键词: 钩吻；生物碱；非生物碱；抗肿瘤活性；作用机制